名词解释 1.初级代谢产品（primary metabolites）是指微生物经过代谢活动发生的，自身成长和繁衍的必需的物质 2.次级代谢产品（second,metabolites）是指微生物成长到必定阶段才发生的化学结构十分杂乱，对微生物 无显着生理功能，或并非是微生物成长和繁衍所必必需的物质。 3.天然选育（selection of spontaneous mutation）是运用微生物在必定条件下发生自发骤变的原理，是经过 别离，挑选扫除阑珊型菌株，从中选出坚持或高于原有出产水平菌株的进程。 4.诱变育种（mutation breeding）是运用物理化学生物诱变剂处理均匀涣散的微生物细胞集体，促进其骤变 率大幅度进步，然后选用简洁高效的挑选办法，从中选出少量具有优秀性状的高产菌株。 5.原生质体（Protoplast）是指微生物在酶的作用下，脱去细胞壁，剩余的原生质膜，包围着的原生质部分。 6.菌种保藏（culture collection）是指将微生物菌种用各种适宜的办法妥善保存，避免逝世污染，坚持其原 有性状根本安稳。 7.培育基（medium）是人工装备的供微生物成长繁衍和生物组成各种代谢产品所需多种养分物质的混合物 8.成长因子(growth factor)是指微生物成长代谢必不可少，但不能用简略的碳源或许氮源组成的一类特别的 养分物质。 9.前体（precursor）在微生物药物的生物组成中，有些化合物能直接被微生物运用构成产品分子结构的一 部分，而化合物自身的结构没有太大的改动。 10.灭菌（sterilization）是指选用物理或化学的办法杀灭或除掉物料及容器中所有活的微生物及孢子的进程 t。 11.乳化进程（emulsification）液体已纤细液滴的办法存在在另一个不相容的液体中 微滤（MF）超滤（UF）反浸透（RO）透析（DL）电浸透（ED） 12.溶剂萃取法（solvent extraction）是指经典的液-液萃取，即用有机溶剂对非极性或弱极性的物质，物质 进行萃取，这是一种运用物质在两种互不相容的液相中分配特性不同而进行的别离进程。 13.双水相萃取法（two-aqueous phase extraction））又称水溶液两相分配技能（partition of two aqueous phase system）它是不同的高分子溶液彼此混合发生的两相或多相系统运用物质在彼此不容法两相间分配系数的 不同来进行萃取的办法 14.吸附法（adsorption method）是运用恰当的吸附剂在必定 ph 条件下，吸附生物样品中的生物药物，然 后再以恰当的洗脱剂从吸附剂上解吸下来到达浓缩和提纯的意图。 15.大孔吸附树脂（macroreticular resin）：不含交流基团且具有大孔结构的高分子吸附树脂 16.沉积法（precipitation）是经过改动溶液的物理改动参数，下降溶液中的某些成分法溶解度，然后使其从 固体凝集物从溶液中沉积出来并与其它成分分隔的技能。 17.色谱法（chromatography）:又称层析法首要是指多种组分的混合物在固定相和活动相中有不同的分配， 在活动进程中经过屡次分配后而取得别离。 18.凝胶色谱（gel chromatographyGFC）是指各种多空凝胶为固定相，运用活动相中所含的各分子组分巨细 的不同而使其别离的一种技能。 19.亲和色谱（affinity chromatography AC）是运用生物大分子与某些对应的专注分子 特异性辨认和可逆结合的特性而树立 的一种别离生物大分子的别离办法。 20.疏水相色谱（HIC）是运用蛋白质外表存有的疏水性部位，与带有疏水性配基的载体在高盐浓度结合， 洗脱时将盐浓度逐步下降，蛋白质因疏水性不同而逐一先后被洗脱。 21.生物制药（biopharmaceutical）：以生物资料为质料或许用生物技能办法制作的药物。 22.三级发酵：将二级种子移至发酵罐作为种子。字 23.杂交育种：是指将两个基因型不同的菌株经符合使遗传物的质重新组合，从中别离和挑选出具有新性状 菌株的过 w w 程。 简答题 1.生物制药工艺流程？ 菌种——斜面培育——种子制备——发酵——发酵液预处理——提取精制——制品查验——制品包装 2.培育基的成分？ 碳源、氮源、磷源、硫源、无机离子（包含微量元素）、成长因子、前体、促进剂、按捺剂、水分和氧气。 3.次级代谢产品特色 特定菌种发生的代谢产品 菌体特定成长阶段的产品 多组分的混合物 4.次级代谢产品为什么是多组分的混合物 1）次级代谢产品的组成酶对底物要求特异性不强 2）次级代谢产品的组成酶对底物作用不彻底 3）同一种底物可以被多种酶催化进行次级代谢进程 5..次级代谢产品构建单位有？代表产品？ 构建单位：氨基酸及其衍生物（多肽类抗生素），糖及氨基糖（氨基糖苷类抗生素），聚酮体及其衍生物 （大环内酯类抗生素），甲羟戊酸衍生物（赤霉素），莽草酸及其衍生物（利福霉素），环多醇和氨基环 多醇（氨基环醇类抗生素-链霉素），碱基及其衍生物（嘌呤霉素）、吩恶嗪酮（放线.次级代谢产品的首要调控机制和生物组成进程？ 组成途径（进程）：构建单位的组成、构建单位的衔接和母核组成后的润饰进程。 调控：酶组成的诱导调理，反响调理，磷酸盐调理，碳分化产品调理，氮分化产品调理，化学调理因子的 调理，操控次级代谢产品生物组成的要素 7.磷酸盐的调理机制（阻挡按捺次级代谢产品） (1）促进初级代谢，按捺菌体次级代谢（2）按捺次级代谢产品前体的生物组成 (3)按捺磷酸酯酶活性 (4）ATP 的调理作用 (5)对次级代谢产品组成酶的调理 (6)调控的分子机制 8.菌种选育的意图？（作用） 进步发酵产值，改善菌种功能，出产新的发酵产品，去除剩余组分 9.微生物对骤变的修正经过哪些作用 1）光修正 2）切补修正 3）重组修正 4）sos 修正系统 5）DNA 聚合酶的校对 10.紫外线诱变首要引起菌体的哪些改动 DNA 键开裂、 DNA 分子内或分子间交联 、DNA 和蛋白质交联、胞嘧啶水合作用、构成嘧啶二聚体等 13.诱变处理进程及挑选办法？ 动身菌株的挑选 诱变处理（1 单孢子悬浮液制备 2 诱变剂处理 3 梯度稀释 4 涂布别离平板） 骤变株的挑选 随机挑选，理性化挑选，高通量挑选 14.骤变后的表型改动以及表型推迟原因？ 改动： 1）骤变不改动遗传性状 2）显性骤变和隐性骤变的表型效应 3）骤变的表型与环境 推迟原因： 1）诱变剂作用的推迟 2）多核细胞中的单个核骤变 3）原有基因产品的影响 15.影响原生质体的要素？ 1)培育基组成 2）菌龄 3）酶浓度 4）酶解温度和 ph5）酶解时刻 6）浸透压安稳剂 7）原生质体构成率的测定 16.原生质体交融进程？ 1）遗传符号的挑选 2）两亲来源核质体的制备 3）原生质体的交融 4）原生质体的再生 5）交融子的挑选 6）挑选优秀品种 17.影响原生质再生的要素？ 1）菌体的生理状况 2）安稳剂 3）酶的作用浓度及作用时刻 4）再生培育基的组成 5）培育基中水分 18.菌种保藏的意图？ 尽或许坚持菌体的存活率和优秀功能，确保菌种经过较长时刻保藏后坚持存活和出产才能。 19.菌种保藏的原理 依据微生物的生理特性，人为地创造条件，使微生物处于代谢不活泼，成长繁衍受按捺的休眠状况，以减 少菌种的变异、退化、逝世、污染。（休眠条件低温，枯燥，缺氧和缺少养分物质） 20.菌种保藏办法？ 1）斜面保藏法 2）液体白腊保藏法 3）沙土管保藏法 4）麸皮保藏法 5）冷冻枯燥保藏法 6）液态超低温保藏法 7）甘油保藏法 21.培育基的品种？ 1）组成培育基，复合培育基（天然培育基） 2）固体培育基，液体培育基（大规划工业出产） 3）孢子培育基，种子培育基，发酵培育基，补料培育基 22.培育基的挑选与优化？ 挑选：单要素实验，正交规划实验，均匀规划实验，呼应面规划实验 优化：1、影响因子的承认 2.影响要素的挑选 3.跟据影响要素和优化要求挑选优化办法 4.实验成果的数学统 计学剖析 5.最佳条件的验证 23.影响培育基质量的要素 原资料质量、水质、培育基的灭菌、培育基的黏度 24.首要灭菌除菌办法 1）高温灭菌（干热灭菌、湿热灭菌）2）过滤除菌 3）化学消毒和灭菌 4）其他灭菌法（辐射灭菌，臭氧灭菌，静电除菌） 25.为什么湿热灭菌比干热灭菌好？ 湿热灭菌（最根底的灭菌办法）运用饱满蒸汽直接作用于需求灭菌的物品足以杀死微生物，蒸汽具有强壮 的穿透力，冷凝时开释很多潜热。具有经济快速的特色，广泛运用在工业出产，适用于培育基、发酵罐、 隶属设备、管道以及其他耐高温物品灭菌。（蒸气进入培育基，时冷凝水稀释培育基，所以在装备培育基 时应扣除冷凝水体积，确保浓度。） 26.培育基灭菌的影响要素？ 1）温度和时刻对培育基灭菌的影响 2）培育基成分，ph，物理状况，泡沫，培育基中微生物数量 27 出产用种子应具有的条件？ 1.成长生机强，移种至发酵罐后能敏捷成长，迟延期短。2.菌体生理特性和出产才能安稳 3.菌体总量及浓度能满意发酵罐接种量的要求 4.无杂菌污染 5.坚持安稳的出产才能 28.种子出产制备进程 1.将沙土管或冻干管保存的种子接种至斜面培育基中培育活化 2.将长好的斜面种子移至扁瓶固体培育基或摇瓶液体培育基中扩展培育 3.将扩展培育的孢子或菌丝接种到一级种子罐，制备出产用种子，如需可进一步接种至二级种子罐扩展培 养 4.将制备好的种子转移至发酵罐进行发酵出产。 29.影响孢子和种子质量的要素别离是？ 孢子要素：培育基，培育条件（温度，湿度），培育时刻，冷藏时刻，接种量。 种子要素：培育基，培育条件（温度，通气量），种龄，接种量。 30 接种量过大有什么影响？ 接种量一般都比较小，在 0.1～1.0％之间，假如过大会添加斜面培育或摇瓶菌丝培育的担负， 对进步种子质量无显着作用。 31.种子质量标准有哪些（断定种子质量的方针） 1.种子成长状况（菌体形状，菌体浓度，培育液外观包含色彩黏度等，）2.养分物质含量及 ph 改动 3.特别酶的生机 4.产品生成量 5.有无杂菌污染 32.发酵进程杂乱性首要特征？ 1.微生物细胞内部结构及代谢反响的杂乱性。 2.所在生物反响器环境的杂乱性，首要是气相液相固相混合的三相系统 3.系统状况时变性及触及参数杂乱性，这些参数互为条件，彼此限制。 33.微生物发酵类型？ 1）按投料办法分类（分批发酵，补料分批发酵，接连发酵） 2）按与氧的联系分类（需氧发酵，厌氧发酵） 3)按发酵动力学参数的联系分类（成长偶联型，部分成长偶联型，非成长偶联型） 34.三种投料办法的优缺陷？ 1.分批发酵：长处 1)发酵工艺简略，发酵进程简略操控 2)发酵进程中，可观察到发酵参数与菌体成长或产 物组成的改动联系然后确认优化的发酵工艺条件供给依据。 缺陷 发酵产值低 2.补料分批发酵：长处 1)可延伸发酵周期，进步产值。2)可避免高浓度养分物质对代谢产品生物组成的按捺 作用。 缺陷：发酵工艺杂乱 3.接连发酵：1)可除掉快速运用碳源的阻挡作用，坚持恰当菌体浓度，不至于加重供氧对立 2）避免培育基 堆集有毒代谢物 3)可进步设备运用率单位时刻产值，节约发酵时刻 4)便于自动操控 缺陷： ① 对设备的合理性和加料设备的准确性要求甚高； ② 养分成分的运用较分批发酵差，产品浓度比 分批发酵低；③ 杂菌污染的时机较多，菌种易因变异而发生退化。 35.简述发酵工艺进程工艺参数的操控 物理参数: 1.温度:表现在①大多数为中温菌多为 20~40℃最适②温度影响酶的活性，因此影响菌体成长和代谢产品的 生物组成③温度影响氧的溶解度④温度影响发酵液的物理性质。 2.压力：①避免外界空气中杂菌的侵入，确保纯种培育②添加氧气的饱满浓度，利于氧气传递。 3.拌和速度：拌和速度凹凸影响液相体积氧传递系数 Kla 4.拌和功率：影响液相体积氧传递系数 Kla 5.空气流量：影响液相体积氧传递系数 Kla 6.表观粘度：表观粘度巨细与发酵液中菌体浓度，菌体形状和培育基成分有关。菌体浓度越大表观粘度越 大，丝状菌的黏度大于球菌和杆菌，丝状真菌黏度大于放射菌。 化学参数： 1.PH：与菌体成长和产品组成有关，ph 改动反响菌体代谢状况，长时刻发酵过低或许是发酵染菌的成果。 2.基质浓度：与菌体成长和产品组成有关①糖浓度测定②氮浓度测定③磷酸盐含量的测定④产品浓度的测 定⑤溶解氧浓度的测定⑥废气中氧含量⑦废气中 co2 含量。 生物参数： 1.菌体浓度：菌体干重，菌体湿重，菌体湿体积。 2.菌丝形状：形状粗细 染色的深浅，脂肪颗粒，空泡。 36.影响菌体浓度要素？菌体浓度与次级代谢产品的产值有什么联系？ 要素：①微生物的品种和遗传特性 ②养分物质品种和浓度 ③菌体成长的环境条件 联系：产率 Rp=Qp·X，浓度越大产值越高。 菌体浓度过高，下降次级代谢产品的产值，其原因： ①菌浓过高时，养分物质耗费过快，养分液中养分成分显着下降，加上有毒物质堆集，或许改动菌 体代谢途径。 ②菌浓过高时，对培育液中溶解氧浓度的影响尤为显着，因为跟着菌浓的添加培育液的摄氧率按比 例添加，表观粘度添加流体性质改动，氧的传递速率成对数的减小。 37.最适菌浓怎么确认？ ①菌浓与摄氧率的联系②菌浓与氧传递速率的联系 ③菌浓与出产速率联系④菌浓与比出产速率的联系 38.最适菌浓的操控？ 1.调理养分基的养分基质浓度来操控菌浓。 2.经过中心补料来操控菌体浓度。 3.向发酵罐中补入无菌水，下降发酵液中菌体浓度。 39.养分物质对发酵的影响及操控？ 一、碳源的影响与操控 对代谢产品的生物组成有阻挡作用。 敏捷运用碳源（中心补料操控） 缓慢运用碳源（菌体成长速率和糖比耗费速率） 二、氮源的影响与操控 氮源（无机氮源，有机氮源）对菌体代谢发生显着影响，影响产品的组成方向和产值。 速效氮源：促进菌体成长，对抗生素的生物组成有按捺作用，下降产率。 缓慢运用氮源：延伸次级代谢产品的排泄期，进步产品产值。一次投入过多菌体过度成长导致菌体变老自 溶，导致产品排泄期短。 经过补加氮源来操控浓度（办法：补加有机氮源，补加无机氮源） 三、磷酸盐的影响与操控 磷酸盐（c 微生物=0.3~300mmol/L，c 次级代谢产品组成=1.0mmol/L）促进菌体成长繁衍，组成代谢必要产 物。操控经过选用恰当磷酸盐浓度来完结。 40.影响生物热的要素？ 菌种特性，菌体的成长阶段，养分物质的品种和浓度，菌体的呼吸强度。 41.温度对发酵的影响，怎么挑选最适温度，怎么操控？ 一、影响酶活性，发酵液物理性质，代谢组成的方向。 二、成长阶段用最适成长的温度，产品阶段用最适产品组成的温度。 1)通气条件差，下降发酵温度。2)培育基养分成分淡薄，下降温度。3)染菌时，下降温度。 三、冷冻盐水循环降温 41.ph 对发酵的影响，影响要素，最适 ph 确认，怎么操控？ 影响酶活性，基质或中心产品的解离状况，发酵产品安稳性。 要素：菌种遗传特性，培育基成分，培育条件 依据实验成果来确认。 操控：调理发酵培育基组成，经过补料操控，在发酵培育基中参加 ph 缓冲剂，改动发酵条件，补加酸碱。 ` 42.影响泡沫构成要素？泡沫对发酵的影响？ 要素：通气和拌和的影响，培育基原资料的影响，培育基灭菌时刻的影响，发酵液物理性质的影响。 影响：1)影响发酵罐的装料系数，下降发酵产值。2)泡沫过多简略逃液，添加染菌时机。3)影响气体交流和 氧的传递。4)发酵液沾到壁上失掉作用，影响放罐体积和产值 5)泡沫严峻时构成菌体缺氧，代谢反常。 43.基因工程菌的特色 安全性、安稳性、高产性、短时性、廉价性 44.基因工程菌的构建？ 1.意图基因的获取 2.宿主的挑选 3.载体的挑选 4.构建重组基因工程菌 5、外源基因的表达 固液别离状况参数：别离功率，含湿量 超滤技能的优越性：1.不需求热处理，对热灵敏物质是安全的 2.没有相改动，能耗低 3.浓缩和纯化一同完 成 4.别离进程不需求加化学试剂 5.设备工艺简略。 影响膜的要素：膜的化学性质，蛋白质品种和溶液 ph，无机盐，温度，料液浓度、流速和压力 溶剂萃取法特色：1.处理才能强，别离率高，运用广泛，对热敏物质损坏少 2、以完结接连化自动化，出产 快捷 3.选用多级萃取溶质浓缩倍数大，纯度高 4.溶剂耗量大，设备和安全要求高。 工业上萃取办法，萃取进程：混合，别离，溶剂收回。单极萃取，多级错流萃取，多级逆流萃取。 萃取剂的挑选：1.分配系数越大越好，类似相容 2.别离因子1 的溶剂 3.料液与萃取溶剂的互溶愈小愈好 4. 毒性低的溶剂 5.溶剂的化学性质安稳，腐蚀性低沸点低，挥发性小，价格便宜便利收回。 影响溶剂萃取内部要素：溶剂功能影响，ph 影响，盐析作用影响，化学萃取剂。 影响溶剂萃取外部要素：触摸比较和传质方向的影响，温度和萃取时刻的影响 工业出产的吸附剂：活性炭，白土，氧化铝，硅胶，大孔吸附树脂。 吸附法特色：1.可不必或少用有机溶剂 2.操作快捷，安全，设备简略 3.出产进程中 ph 改动小。 影响吸附进程的要素：吸附剂性质，被吸附物性质，吸附条件，吸附物浓度与吸附剂用量。 盐析法盐浓度要高！硫酸铵是盐析法大规划出产仅有可选中性盐。 有机溶剂沉积法原理：1.损坏容质分子周围水化层，脱水集合分出。2.下降介电常数（脂溶性增强），带电 粒子库仑力增强凝集沉积。 色谱别离进程特色：运用广泛，别离功率高，操作方式多样，可进行高灵敏度在线检测。 凝胶的品种：聚丙烯酰胺凝胶，葡萄糖凝胶（最常用，孔径越大越适宜大分子别离，颗粒的机械强度随孔 径的增大而下降，较高的操作压使颗粒变形洗脱液流速下降），琼脂糖凝胶，聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶，葡 聚糖琼脂糖凝胶。 亲和色谱（专注行特异性极强）是蛋白质纯化的重要办法，具有很高的挑选性和别离功能以及较大的载量， 操作简略。 疏水彼此作用色谱别离介质配基一个重要特征：弱疏水性，确保蛋白质活性不损失。 基因工程的根本进程：意图 dna 制备载体 DNA 挑选 DNA 体外重塑技能重组 DNA 的转化实验重组克隆的筛 选和判定，意图基因表达产品的挑选和判定。 生物别离纯化办法的挑选依据:1 方针物的理化性质和安稳性 2 各种别离纯化办法的适用范畴 3 别离纯化技 术 的别离功率 4 出产成本 5 别离纯化的依据 6 各种别离纯化的组合次序。 深层过滤。 深层过滤中物料的性质及介质的功能对过滤功率的影响表现在 1 过滤功率与物料的密度形状有关 2 过滤介 质的空地越不规则，比外表积越大，弯道越多，过滤作用越好 3 流速越高，过滤效越低，4 料浆温度升高， 粘度下降，滤液质量随之升高 5 关于迁徙进程中重力起主导作用的过滤上流式与下流式过滤的功率无差异。 助滤剂的运用办法有两种 1 用助滤剂配成的悬浮液 2 将助滤剂混在泥浆中一同过滤。 超滤和微滤是简略的筛分进程，溶质或悬浮物料依照巨细不同而别离，比膜孔小的物质和溶剂（水）一同 经过膜。而较大的物质则被截留。 超滤技能的优越功可以简略的概括为 1 操作进程不需求热处理故对热灵敏的物质是安全的，2 没有相的变 化能耗低 3 浓缩和纯化可以一同完结 4 别离进程不需求参加化学试剂 5 设备和工艺较其他别离纯化的办法 简略，且出产功率高。 能斯特提出的分配规律在必定温度必定压力下某一溶质在互不相容的两种溶剂间分配时，到达平衡后，在 两相中的浓度之比为常数。Cl/Cb=k 表征溶剂提取的重要参数：萃取因子，萃取率，别离因子。 细胞破碎和 碎片别离：机械法规划出产中常用高压匀浆机，和高速球磨机前者首要是运用液相剪切力和固 定外表冲撞力发生的应力;后者首要依托研磨两者机制不同，彼此弥补。细胞破碎技能的老练使大规划出产 细胞内产品成为或许，非机械法：化学法 酶解法。物理法：浸透压冲击法，冻融法，枯燥法。细胞碎片的 别离：一般用离心别离法但困难一般较新的办法是双水相萃取法挑选恰当的条件，使细胞碎片会集分配在 下相。 双水相萃取法的特色及分类：保存产品活性整个操作可接连化，除掉细胞或碎片时，可以纯化蛋白质 2-5 倍。 1 互不相容构成两个水相两种高聚物别离富集于上下两相 2 复合凝集也构成两个水相但两种高聚物都分配 于一相，另一相简直悉数为溶剂水 3 彻底互溶，构成均相的高聚物水溶液。 影响双水相萃取的要素：1 成相高聚物浓度-界面张力 2 成相高聚物的分子量 3 电化学分配-盐类的影响 4 生 物亲和分配 5 疏水效应 6 温度其他要素 双水相萃取的运用：1 双水相分配进行离子浓缩 2 双水相系统萃取细胞内酶 3 双水相酶法 4 双水相萃取干 扰素的工业规划实例。 离子交流法（树脂法）是运用组成的离子交流树脂作为洗着剂，将溶液中的物质依托库仑力吸附在树脂上， 然后用适宜的洗脱剂，将洗着物从树脂上洗脱下来，到达别离浓缩提纯的意图。 离子交流树脂的分类：1 强酸性阳离子交流树脂（活性基团：磺酸，PH 对交流才能的影响：无，盐的安稳 性：安稳，再生：用 3-5 倍的再生剂，交流速度：快）2 弱酸性阳离子交流树脂（羧酸，在酸溶液中交流能 力很小，洗刷时水解，用 1.5-2 倍的再生剂，慢、除非离子化）3 强碱性阴离子交流树脂（季铵 ，无，稳 定，用 3-5 倍的再生剂，快）4 弱碱性阴离子交流树脂（手足叔铵，在碱性溶液中的交流才能很小，洗刷时 水解，用 1.5-2 倍的再生剂可用碳酸钠和氨水，慢除非离子化） 离子交流法的原理及特色：是运用组成的离子交流树脂作为吸附剂，将溶液中的物质依托库仑力吸附在树 脂上，然后用适宜的洗脱剂洗脱下来到达别离浓缩提纯的意图。特色：树脂无毒性且可以重复再生运用， 少用或不必有机溶剂因此设备简略操作便利劳动条件较好的长处 成为提取抗生素的首要办法之一。 影响交流速度的要素：1 颗粒巨细 颗粒减小无论是对内部涣散的操控或外部涣散操控的场合都有利于交流 速度的进步。2 交联度 交联度越低树脂内部涣散越简略。3 温度正比 4 离子化合价反比 5 离子的巨细 小速 度快 6 拌和速度 正比必定程度后影响减小 7 溶液浓度 0.001mol/l 一般为外涣散操控 正比 0.01mol/l 浓度 再添加交流速度慢，此刻外涣散和内涣散一同起作用，浓度再添加交流速速到达极致后不再增大，内涣散 起作用 离子交流层析的原理是什么：离子交流层析是依据溶液中的各种带电颗粒与离子交流剂之间结合力的差异 进行的别离，因为待别离的溶质分子带有不同性质的电荷和不同性质的电荷量，因此在作为固定相的离子 交流剂和活动相的洗脱液之间，发生可逆交流作用，并经过调理洗脱液的 ph 值，或改动同性离子浓度等方 法，使溶质的移动速速发生改动，然后到达别离的意图。 依据离子性质、电荷强弱及洗脱的难易来挑选树脂 1 带正电荷的碱性生物活性物质用阳离子树脂，带负电荷的酸性生物活性物质用阴离子交流树脂。2 树脂交 换离子的办法为阳树脂有机酸型（氢型）和盐型（Na,K）和阴树脂有碱型（羟型）和盐型（CL 和 SO4-）.3 树脂的体积交流容量和运用寿命在工业上这些要素联系到工艺技能的可行性，设备出产才能和出产效益的 好坏。 物理吸附于化学吸附的特色：物理吸附 1 作用力：范德华力 2 吸附力：较小，挨近液化热 3 挑选性：简直 没有 4 吸附速度：较快，需求的活化能很小 5 吸附分子层：单分子层或多分子层，化学吸附 1 作用力：库 仑力 2 吸附力：较大，挨近反响热 3 挑选性：有挑选性 4 吸附速度：慢，需求较高的活化能 5 吸附分子层： 单分子层。 大孔吸附树脂的吸附机制：大孔吸附树脂可以凭借范德华力从溶液中吸附各种有机物质，大孔树脂的吸附 才能不光与树脂的化学结构和物理性质有关，并且与溶液及溶质的性质有关，依据类似物简略吸附类似物 的原理，一般非极性吸附剂适从于极性吸附剂中汲取非极性物质，相反高极性吸附剂适从于从非极性看、 溶剂中吸附极性物质。而中等极性的吸附剂则对上述两种状况都可以 盐析法的操作进程影响要素 ：中性盐的挑选，PH 的挑选，温度，时刻的操控，盐饱满度的操控。要素：1 盐离子品种的影响（最常用硫酸铵，大规划出产中仅有可用）2 盐离子饱满度的影响（是影响生物大分子 盐析最首要的要素）3 生物分子浓度（蛋白质 2%-3）4PH 对盐析的影响（沉积分出 ph 的等电点。不分出偏 离。）5 温度对盐析的影响（抛物线 植物药的水提液和生物发酵液中一般含有很多蛋白质，他们涣散成颗例，呈胶体状况 2 萃取系统中含有呈胶体状况的和极纤细的颗粒或杂质。3 发酵液染菌后料液中的成分发生改动 4 有机相的 理化性质，有机相粘度过大，化学性质不安稳发生分化易发生乳化的物质，5 为了两相的的充沛混合人们 往往过度拌和而构成涣散相液滴的过度涣散导致乳化。水包油 O/W 油包水 破乳化的意图：为了确保溶剂萃取操作的正常运转，一方面要加强溶剂萃之前的预处理和过滤操作使蛋白 质含量到达最低，另一方面在溶剂萃取中采纳一些办法进行破乳化。 凝胶色谱根来源理：大分子因为分子直径大因为分子直径大，不能进入凝胶的微孔中，只能散布于凝胶颗 粒的空隙中，以较快的速度，流过凝胶柱，较小的分子可以进入凝胶的微孔中不断进出于一个个颗粒的微 孔表里，这就使小分子的物质向下移动的速度比大分子的速度慢，然后使混合液中的各组分依照分子量由 大到小的次序先后流出层析柱，到达别离的意图。 凝胶色谱的长处：条件温文，简洁易行，别离的分子量规模广，别离作用一般不受缓冲剂组成的影响，每 一次操作后无需再生处理就可以进行下一步的别离。 亲和色谱：根来源理是运用生物大分子对某些对应的专注分子特异性辨认和可逆结合的特性而树立起来的 一种别离生物大分子的色谱办法。操作进程：配基固定化，吸附意图产品，样品解吸。 晶体纯度：在结晶进程中的杂质的存在不可避免，而杂质的存在对晶体的成核,成长，聚会等都有必定的影 响并终究影响晶体的形状，粒径及粒度散布等。晶体愈纤细。比外表积越大，外表自由能愈高，杂质越多。 影响晶体巨细的要素：1 过饱满度 2 温度 3 拌和速度 4 晶种